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『New スーパールイージ U』ではマリオが登場しないため、ストーリーモードでの1人プレイはルイージのみ(隠し操作でトッテンに交代可能)となっている。
『New スーパーマリオブラザーズ U デラックス』では、ストーリーモードでも1人プレイで自由にキャラクターを選択可能(Miiを除く)になっている。なお、こちらも『New スーパールイージ U』モードではマリオを選択できない。
; [[マリオ (ゲームキャラクター)|マリオ]]
: 本作の主人公。『New スーパールイージ U』では操作できない。
; [[ルイージ (ゲームキャラクター)|ルイージ]]
: マリオの双子の弟で、『New スーパールイージ U』の主人公。能力はマリオと同
; [[マリオシリーズのキャラクター一覧#きいろキノピオ|きいろキノピオ]]・[[マリオシリーズのキャラクター一覧#あおキノピオ|あおキノピオ]]
: 『New スーパーマリオブラザーズ Wii』に続いて、黄色と青の[[キノピオ]]がプレイヤーキャラクターとして登場。能力はマリオやルイージと変わらない。
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