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[[光学顕微鏡]]での分解能は、2点分解能をもって定義される。非干渉性で直進並行光の理想光源が照射されている事を前提とした上で、目視の分解能を出すためには550nm(緑色光)で計算しレイリーとアッベの定義に従うとされるが、照明光の開口数によって分解能に違いが出る<ref>[http://bioimaging.jp/learn/045/ 第3回】顕微鏡の能力 その1 〜分解能と倍率〜] オリンパス</ref>。
 
===レイリー(Rayleigh)の分解能 (レーリーの基準)===
 
λ [[ジョン・ウィリアム・ストラット|レーリー]]の定義における2つの点光源の分解能δ光の[[波長]]をλ''NA'' は[[対物レンズ]]の[[開口数]]''nNA''物体と対物レンズの間の媒質の[[屈折率]]を''n''θ は物体から[[対物レンズ]]に入射する[[光線]]の光軸に対する最大角度をθとしたとき、
2つの点光源の分解能 <math>\delta</math> は、[[ジョン・ウィリアム・ストラット|レーリー]]の定義によれば、
 
λ は光の[[波長]]、''NA'' は[[対物レンズ]]の[[開口数]]、''n'' は物体と対物レンズの間の媒質の[[屈折率]]、θ は物体から[[対物レンズ]]に入射する[[光線]]の光軸に対する最大角度としたとき、
:<math>\delta = \frac{0.61 \times \lambda}{NA} = \frac{0.61 \times \lambda}{n \sin \theta}</math>
 
となる。
 
===アッベ(Abbe)の分解能===
 
試料に平行光線を当てると直進光(0次回折光)と2つの回折光(±1次回折光)に分かれ、この3つの光が中間像位置で干渉して像を形成する<ref>[http://www.hitachi-hightech.com/jp/products/science/tech/em/sem/technique/chapter16_3.html 構造細胞生物学のための電子顕微鏡技術 16.電子顕微鏡の原理] 日立ハイテクノロジーズ</ref>。
:<math>\delta = \frac{\lambda}{NA} </math>
 
となる。
 
===ホプキンス(Hopkins)の分解能===
より現実的に考えれば、K 照明状態''K''によって変化する定数が必要で、
 
より現実的に考えれば、K 照明状態によって変化する定数が必要で、
:<math>\delta = K \frac{\lambda}{NA} </math>
 
となる。