「定量PCR」の版間の差分

#それぞれの試料の反応を同じ条件で同じ時間だけ（できれば同じ[[プライマー]]を用い、または少なくとも同じ位の[[ポリメラーゼ連鎖反応|アニーリング]]温度で）行なう。

定量PCRの中で最も正確で信頼できるのが蛍光プローブを用いた方法である。しかし最も高価である。この方手法では配列、増幅領域両端の2種類のプライマーに特異加えて、増幅領域内に相補的なRNAまたはDNAを基にした結合する蛍光プローブを用いるので、目的の配列のみを定量できる。すなわち前述の方法の様にすべての二重鎖DNAに反応することはない。

通常はプローブはRNAを基にし、蛍光レポーターとその隣りにクエンチャー（励起エネルギー吸収剤）を入れる。クエンチャーの近くのレポーターは蛍光が抑制される。従って蛍光がみられるのはプローブが分解した時のみである。この過程は使用する[[DNAポリメラーゼ]]の5'→3'[[ヌクレアーゼ|エキソヌクレアーゼ]]活性に依よる。